Od 1880s , škvrna skúšobné Gram zostáva dôležitá metóda bakteriálne identifikáciu a klasifikáciu . Mikrobiológov často vykonať skúšku Gram ako prvý krok v identifikácii konkrétne typy tyčinkové baktérie z rodu Bacillus . Gram farbenie je menovaný pre jeho vynálezca , dánsky bakteriológ Hans Christian Gram . Technika práce z dôvodu rozdielu v gram pozitívne a gram – negatívne bakteriálnej bunkovej steny fyziológie . Niektoré grampozitívne tyče spôsobiť vážne ochorenia, ako je antrax a tetanus.Things budete potrebovať
šatách laboratória
Rukavice
Čistenie krytiny
Tlakový hrniec
baktérie kolónie
Agar
Petri riadu
Water
Očkovanie slučka
sklíčko
Metanol
Bunsen horák
Crystal fialové škvrny
jódu škvŕn činidlá
Decolorizer
Safranín
Fuchsín riešenie
Savý papier
Mikroskop
Zobraziť ďalšie inštrukcie Cestuj 1
Zaistite použitie čistej , aseptické laboratórnych priestor k realizácii škvŕn testu Gram . Noste čisté laboratórne odev a topánky krytiny , aby sa zabránilo kontaminácii . Pri manipulácii s bakteriálne kultúry používajte rukavice a masku . Izolovať kolónie baktérií pre testovanie a pestovať ju na živiny bohaté agare v Petriho miskách . Pred použitím sterilizujte v Petriho miskách a agar tlakovom hrnci .
2
Pridá sa niekoľko kvapiek čistej vody na kultivačné misky . Distribuovať rovnomerne na agare . Pretiahnite inokulácie slučku ľahko cez povrch agaru . Preneste vzorku na sklo čisté sklíčko a potrite rovnomerne v kruhovej oblasti o veľkosti desetník . Udržujte veľkosť vzorky minimálne ; mali by ste byť sotva vidieť voľným okom .
3
Aplikujte 95 percent metanolu po prezentácii náteru po dobu dvoch minút na opravu buniek a zabránenie narušeniu ich morfológie . Air suché snímku alebo teplo jemne ju na miernom plameni horáku Bunsenovým . Presuňte snímku back – a – ďalej sa teplo rovnomerne a vyhnúť lokalizované horúce škvrny . Aplikujte teplo rovnomerne a dôsledne . Vyvarujte sa snímka z plameňa až budete hotoví zahriatie .
4
Pour kryštál fialový fľak činidlo cez pevnú snímky . Nechajte odstáť po dobu 30 až 60 sekúnd . Umyte škvrnu pod tečúcou vodou po dobu niekoľkých sekúnd . Vypustite prebytočnú vodu zo snímky . Zakryte snímku s jódu škvŕn činidlom dobu 30 až 60 sekúnd . Umyte jód s vodou z vodovodu . Nakloňte sklíčko a pridajte niekoľko kvapiek Decolorizer . Použite ju do odtoku čistej . Umyte snímku .
5
Namočte snímku s ružovo – farebné safraninovým proti farbiacim činidlom po dobu 30 sekúnd . Môžete nahradiť základné fuchsín riešenie pre Safranín . Jemne umyte snímku a chvenie prebytočnej vody . Vymaž ju osušte savým papierom a potom sa vysuší na vzduchu snímku . Skontrolujte pripravené sklíčko pod mikroskop so zdrojom svetla . Pozrite sa na identifikáciu a grampozitívnym baktériám tyče s modrým alebo fialovým sfarbením od škvŕn testu Gram .