polymerázovej reťazovej reakcie , alebo PCR , je technika používaná na vytváranie kópií DNA . Konkrétne , PCR používa enzým známy ako polymerázy , ktorá pridáva jednotlivé báz DNA do rastúceho reťazca DNA . PCR reakcia je závislá na primery , krátke reťazcov DNA polymeráza musí začať reprodukciu DNA , primérov a matrice , zmes činidiel samotných a primery . Každá PCR reakcia by mal byť celkový objem viac ako 50 uL.Things budete potrebovať
10x PCR Buffer
2mm dNTP
50pmol primery
25mm MgCl2
1 pmol šablóna DNA
čistená voda
skúmaviek Eppendorf
Zobraziť ďalšie inštrukcie
Stránka 1
Pridať 2,5 ul PCR pufra do skúmavky Eppendorf , rovnako ako 2,5 ul dNTP .
2
Pridať 2 uL ( 50 pmol ) primérov do mikroskúmavky a 1 ul MgCl2 .
3
Pridať vodu pre dosiahnutie konečného objemu 50 uL . Pridať 1 pmol templátové DNA alebo 1 ul roztoku DNA , podľa toho, čo je jednoduchšie merať . Váš primer matice je pripravený .
4
Opakujte kroky 1 až 3 pre toľko matice , ako chcete pripraviť .