Overovací Column techniky v HPLC

Vysoko účinná kvapalinová chromatografia ( HPLC ) , je cenným nástrojom pre moderné organické chemikov , pretože umožňuje nielen k oddeleniu zmesi na jednotlivé zložky , ale aj na kvantifikáciu, koľko z každého je prítomný . Aj keď HPLC zariadenia sú sofistikované nástroje , môže byť ich výkon sa postupne zhoršuje v priebehu času . Aby sa zabezpečilo , že fungujú správne a že poskytuje spoľahlivé výsledky , je dôležité overiť ich výkon pravidelne . Prietok & Tlak

čerpadlá musia byť schopné udržať presné hodnoty prietoku . Testovanie prietoku je veľmi jednoduché a vyžaduje len meranie množstva času potrebného pre zber ľubovoľne zvolené množstvo rozpúšťadla zo stĺpca v rôznych nastavení prietoku . Tlak čerpadla môžu byť testované pripojením výstup čerpadla s mŕtvym maticou a pripojenie rekordéra na meranie tlaku čerpadla hlavou . Tlak by mal rýchlo zvýšiť na asi 3000 libier na štvorcový palec ( PSI ) , potom sa zvýši viac postupne na vyšší tlak , na ktorom mieste sa čerpadlo automaticky vypne . Ak tlak kolíše na 3000 PSI alebo rýchlo klesá po čerpadlo sa vypne , to zvyčajne znamená poruchu , ako netesnosti v systéme .
Gradient

čerpadlo musí byť tiež schopný presne meniť zloženie rozpúšťadlové fázy alebo mobilné , tak za použitia zmesi alebo preplachovací z kolóny čoraz viac nepolárne zlúčeniny , ako percentuálny podiel menej polárne rozpúšťadlá sa zvyšuje . Gradient presnosť je testovaná pomocou dvoch kanálov naraz , jeden z nich poskytuje čisté rozpúšťadlo a iné rozpúšťadlá s rozpustenou sledovacieho chemikálie , ako je kofeín . Pretože koncentrácia druhej zvyšuje riešenie , môžete zmerať ultrafialové ( UV ) absorbancie výstupu stĺpce a použiť tieto dáta na overenie správnosti prechodu .
Injector modul

presnosť vstrekovače modulu môže byť testovaná prevedením šesť replík injekciu s jedným vzorkou ; významné rozdiely vo výsledkoch naznačujú , že máte problém . Niektoré experimenty zahŕňajú variabilný objem injekcie , takže to je tiež dôležité otestovať schopnosť vstrekovač je k tomu zodpovedajúce množstvo vzorky . Vykonávaním injekcie cez mikrolitrov rozmedzí 0 až 100 , chemik môže získať a vytlačiť dáta a určiť vzťah medzi výsledkami a koncentráciou vzorky . Slabá korelácia naznačuje poruchu .
Detector Module

záznamy detektor modul absorbancie pre rozpustené látky a elučného rozpúšťadla alebo prúdiaci zo spodnej časti kolóny , takže jej presnosť je obzvlášť dôležité pre zaistenie dobré výsledky . Mnoho HPLC nástroje zahŕňajú schopnosť zabudovaný overovací vlnová dĺžka zabezpečiť , vlnová dĺžka detektora používa , je rovnaká ako tá , ktorú ste si vybrali . Ďalší test zahŕňa použitie radu vzoriek , ktoré obsahujú zvyšujúcej sa koncentrácii zlúčeniny , ako je kofeín . Chemik potom možno vykresliť výsledky proti koncentrácii skúšaného roztoku a určiť silu korelácia . Slabá korelácia naznačuje poruchu .

Pridaj komentár