gradientu gél je zmes dvoch koncentrácií akrylamidu gélu , ktorý sa naleje takým spôsobom , aby sa vytvoril hladký prechod z vysokej koncentrácie akrylamidu v dolnej časti na svetlejšie spojenie v hornej časti . Všeobecne sú čerpané do kaziet , ktoré zvierajú gélu medzi dvoma tabuľami skla . Gradient gel kazety sú používané v laboratóriu pre stanovenie bielkovín hmotnosť a vlastnosti migrácie ťažkých organických molecules.Things budete potrebovať klipart gél kazetu
2 – komorový gradientu tvorca
miešanie stať
2 miešacie tyčinky
Gradient riešenie gél
persíranový amónny ( APS )
Tetramethylethylene diamín ( TEMED )
Voda nasýtená n – butanol
Zobraziť ďalšie inštrukcie
Nastavenie prístroja
1
Zostavte kazetu gél podľa návodu výrobcu , zabezpečenie toho , že v spodnej časti kazety je úplne uzavretý .
2
Umiestnite prechodu výrobcu na miešanie stánku na vyššej úrovni , než v hornej časti zásobníka . Umiestnite miešadlo v každej komore . Uzavrite všetky východy a umiestnite výstupnej trubice v hornej časti zásobníka , takže gél bude prúdiť do stredu hornej časti zásobníka .
3
Vyplňte nonoutlet valec prechodu výrobcu s gél roztok zmieša s najnižšou požadovanú koncentráciu . Otvorte kohútik medzi dvoma valcami vypratať všetky vzduchové bubliny a zatvorte kohútik . Naplňte výstupný valec s gélovým roztokom zmiešané s najvyššou požadovanú koncentráciu .
Nalievanie Gel
4
Mix 1 ml APS a 0,1 ml TMED na 100 ml gradientu gélu do každého valca .
5
Otvorte kohútik medzi valcami . Otvorte zásuvku na prietoku , ktorý bude vyprázdnenie valca v 5 – 8minut . Miešajte obsah výstupný valec konštantne , kým oba valce sú úplne vypustené .
6
Šablóna gél s vodou nasýtený n – butanol .